Benmargsaspirat hjælper i behandlingen af ​​nonhealing sår.

Et klinisk forsøg med effektiviteten af ​​et knoglemarvsaspirat som et middel til behandling af nonhealing sår læsioner er blevet udført. Gennemførelsen af ​​denne behandlingsmetode var baseret på immunmodulerende virkning, stimulering af vævsregenerering og hæmatopoiesis.

Aspiratet blev opnået ved at aspirere knoglemarven fra patientens ileum og blev påført direkte på såroverfladen. Opmuntrende resultater blev opnået: i løbet af ugen blev såroverfladen reduceret med mere end 50%, stimulering af epithelisering og vaskularisering blev noteret, sår blev ryddet af nekrotiske elementer, hvilket var vigtigt for sårheling. Forfatterne bemærker, at denne teknik har en god fremtid, men der er behov for yderligere kliniske forsøg på et betydeligt antal patienter.

Benmargsaspirat hjælper i behandlingen af ​​nonhealing sår.

Et klinisk forsøg med effektiviteten af ​​et knoglemarvsaspirat som et middel til behandling af nonhealing sår læsioner er blevet udført. Gennemførelsen af ​​denne behandlingsmetode var baseret på immunmodulerende virkning, stimulering af vævsregenerering og hæmatopoiesis.

Aspiratet blev opnået ved at aspirere knoglemarven fra patientens ileum og blev påført direkte på såroverfladen. Opmuntrende resultater blev opnået: i løbet af ugen blev såroverfladen reduceret med mere end 50%, stimulering af epithelisering og vaskularisering blev noteret, sår blev ryddet af nekrotiske elementer, hvilket var vigtigt for sårheling. Forfatterne bemærker, at denne teknik har en god fremtid, men der er behov for yderligere kliniske forsøg på et betydeligt antal patienter.

Benmarg aspiration

Hvad er knoglemarvs aspiration?

Benmarg aspiration er en procedure, der involverer at tage en prøve fra blødt væv inde i dine knogler. Knoglemarven er et svampet væv fundet inde i knoglerne. Det indeholder celler, som producerer hvide blodlegemer, røde blodlegemer og blodplader i større ben, såsom:

Leukocytter hjælper med at bekæmpe infektion. Erythrocytter bærer ilt og næringsstoffer. Blodplader kan tykke blodet.

Hvis et fuldstændigt blodtal angiver, at antallet eller funktionen af ​​røde blodlegemer, leukocytter eller blodplader er unormalt høj eller lav, kan din læge måske undersøge dit knoglemarv for at hjælpe med at bestemme årsagen. Benmarg aspiration udføres ofte med en knoglemarvsbiopsi, der bruger en anden type nål til at fjerne væv fra dit knoglemarv.

Hvorfor udføres knoglemarvs aspiration?

Talrige forhold er forbundet med usundt knoglemarv. Hvis dine indledende blodprøver viser lave niveauer af hvide eller røde blodlegemer eller blodplader, kan din læge bestille en knoglemarvs aspiration. Testen bruges til at kontrollere sygdommen såvel som at overvåge progressionen eller behandlingen af ​​en specifik sygdom.

Betingelser og sygdomme forbundet med knoglemarvsproblemer omfatter:

  • anæmi, hvilket er antallet af røde blodlegemer
  • knoglemarvssygdomme, såsom myelofibrose eller myelodysplastisk syndrom
  • blodceller såsom leukopeni eller polycytæmi
  • kræft i knoglemarv eller blod som hæmokromatose leukæmi eller lymfom
  • , som er en genetisk sygdom, hvor der dannes jern i blodet
  • , især kroniske sygdomme som tuberkulose
  • lagringssygdomme som amyloidose eller Gaucher sygdom

Benmarg aspiration kan også være en vigtig test, hvis du har en kræftbehandling. Dette kan hjælpe med at bestemme om kræften har spredt sig til benet.

Hvad er risikoen forbundet med knoglemarvs aspiration?

Benmargsundersøgelserne er sikre, men alle medicinske procedurer bærer en eller anden form for risiko. I sjældne tilfælde er følgende komplikationer mulige:

  • allergisk reaktion på anæstesi
  • overdreven blødning
  • en infektion
  • langvarigt ubehag

Risici er sjældne og er oftest forbundet med tilstande, der forårsager et svækket immunsystem eller lavt antal blodplader. Et svækket immunsystem kan gøre dig mere modtagelig for infektion, og lavt antal blodplader øger risikoen for for høj blødning.

Sådan forbereder du på knoglemarvs aspiration

Du skal fortælle din læge om eventuelle medicin, du måtte tage, herunder over-the-counter (medicin) eller kosttilskud. Du skal også fortælle dem om eventuelle allergier. Din læge kan bede dig om at holde op med at tage visse lægemidler før proceduren. Men du bør ikke stoppe med at tage medicin, medmindre din læge giver dig dette.

Fortæl din læge, hvis du er nervøs for proceduren. De kan give dig et mildt beroligende middel, der hjælper dig med at gennemgå proceduren.

Følg lægens anvisninger før proceduren.

Hvordan knoglemarvs aspiration udføres

Du bliver bedt om at ændre dit hospital tøj og ligge på din side eller i maven. Din krop vil blive dækket af en klud, så kun undersøgelsesområdet bliver synligt.

Din læge vil kontrollere din puls og blodtryk før aspiration af knoglemarv.

Før proceduren får du lokalbedøvelse til at studere det område, hvor aspiration finder sted. Dette er normalt øverst på bagsiden af ​​hoftefugen. Nogle gange kan det tages fra brystet.

Din læge vil lave et lille snit, som gør det nemmere for hule nåle at trænge ind i huden. Nålen går så ind i benet. Din læge bruger en sprøjte på nålens bagside for at tegne væskedelen af ​​knoglemarven.

Umiddelbart efter proceduren bliver snittet bandageret, og du vil gå til et andet rum for at hvile, inden du går hjem.

Efter knoglemarvs aspiration

Du kan føle lidt smerte omkring en uge efter proceduren. Du kan normalt administrere det med OTC smertestillende midler. Du bliver også nødt til at tage sig af snit såret. Du skal holde såret tørt i 24 timer efter proceduren.

Mens du tager hånd om dit sår, sendes din knoglemarvsprøve til et laboratorium til testning. Din læge vil gennemgå testresultaterne med dig under et opfølgningsmøde.

Mikroskopisk undersøgelse af knoglemarvsaspirat for maligne lidelser i hæmatopoiesis - en sammenligning af to metoder til fremstilling af dias

Mikroskopisk undersøgelse af knoglemarvsaspirater kræves under diagnosen af ​​mange neoplastiske hæmatopoietiske sygdomme. I 2008 anbefalede International Committee for Hematology Standardization at bruge to typer dias til mikroskopisk vurdering af knoglemarv: en kileformet film og dias til at knuse filmen. Da disse metoder endnu ikke er blevet sammenlignet, lavede vi en sådan sammenligning. Normale knoglemarvsprøver fra 250 patienter diagnosticeret på grund af forskellige neoplastiske hæmatologiske lidelser blev evalueret. De vigtigste forskelle mellem de to sammenlignede metoder blev fundet hos 13 patienter med ikke-Hodgkins lymfom, syv patienter med systemisk mastocytose og 11 patienter med akut leukæmi eller myelodysplastiske syndromer eller med kronisk myelomonocytisk leukæmi. Forskelle blev også konstateret hos mange patienter med multipelt myelom, men den kliniske betydning af disse uoverensstemmelser var ret beskeden. Hovedårsagerne til de observerede forskelle var tilsyneladende fortyndingen af ​​knoglemarven med blod og fokalvæksten af ​​mange neoplastiske celler. Vi tror, ​​at crush-teknikken er mere rentabel sammenlignet med film med kileforlængelse. Derfor anbefaler vi at bruge knusningsfilm som den primære metode til at etablere diagnose eller træffe terapeutiske beslutninger baseret på mikroskopisk undersøgelse af knoglemarv.

Mikroskopisk undersøgelse af knoglemarv forbliver en af ​​de vigtigste diagnostiske procedurer i hæmatologi. Ifølge de seneste anbefalinger vedrørende diagnosen maligne neoplasmer i knoglemarv og lymfesystem fra Verdenssundhedsorganisationen (WHO) er betydningen af ​​mikroskopisk undersøgelse af knoglemarv ikke blevet mindsket; Men mere præcise morfologiske kriterier blev bestemt, når det var nødvendigt for at undgå tvetydighed.

For mange sygdomme blev der fundet mere specifikke immunologiske eller molekylære markører, som i sammenligning med mikroskopisk undersøgelse tillader en langt mere præcis vurdering af antallet af atypiske celler. Sådanne markører er imidlertid ikke tilgængelige for alle sygdomme, og mikroskopisk undersøgelse forbliver den eneste eller vigtigste metode til diagnosticering og overvågning af terapien, der udføres. Derudover er der behov for periodiske mikroskopiske undersøgelser af knoglemarv for sygdomme, hvor diagnosen er baseret på genetiske metoder eller immunophenotyping, for hurtigt at kontrollere forskellige manifestationer af transformationstilstanden eller sekundære dysplastiske ændringer. WHO-klassificeringen stiller meget høje forventninger til cytologer, da den endelige diagnose ofte er baseret på korrekt estimerede procentdele af knoglemarvscellesammensætning. I vores kliniske praksis gav vurderinger af benmargsaspiration i samme patient, udført i forskellige laboratorier, forskellige resultater, selvom hver vurdering blev udført i overensstemmelse hermed. Disse forskelle skyldtes hovedsagelig eksistensen af ​​to diasfremstillingsmetoder. Den Internationale Hematologi Standardiseringskomité (ICSH) anbefaler at bruge to typer dias til mikroskopisk vurdering af knoglemarven: en kileformet film (teknik 1) og en strålfilm (teknik 2) dias [1]. De to ovennævnte metoder er endnu ikke blevet sammenlignet med relevans for diagnose og overvågning hos patienter med hæmatologiske lidelser. Formålet med denne undersøgelse var at sammenligne metoderne for kileudbredelse og filmknusning og bestemme hvilken som er mere egnet til diagnosticering og / eller overvågning af specifikke grupper af hæmatologiske lidelser.

Knoglemarvsprøver blev samlet fra 250 patienter diagnosticeret og behandlet i afdeling for hæmatologi og transplantologi ved Gdansk Medical University. Benmargsaspirater blev taget fra den bageste ileal ryg i overensstemmelse med ICSH-anbefalingerne [1]. Kun knoglemarvsaspirater indeholdende partikler blev analyseret. Smøre fra hver knoglemarvsprøve blev fremstillet under anvendelse af begge teknikker af den samme specialist i ikke mere end 20 minutter efter aspiration. I teknik 1 blev prøven udsmeltet på en glasskinne ved anvendelse af kanten af ​​et andet glas, mens partiklerne i teknik 2 blev komprimeret mellem to glasskinner. Efter farvning med maj-Grunwald-Giems-metoden blev lysbillederne underkastet mikroskopisk undersøgelse i overensstemmelse med ICSH-retningslinjerne [1]. I diaserne opnået ifølge fremgangsmåde 1 blev et embryonisk differentieret antal celler udført i områderne umiddelbart foran knoglemarvspartiklerne. I gliderne opnået ved fremgangsmåde 2 blev kun velfordelte knoglemarvsceller analyseret omkring knoglemarvspartiklerne. Områder med et betydeligt antal beskadigede celler blev udelukket. Benmargcelle densitet blev vurderet med en stigning på × 100 og × 400 og blev beskrevet som: aplastisk, meget lav, lav, medium, høj eller forøget. De samme stigninger blev anvendt til at estimere antallet af megakaryocytter beskrevet nedenfor: fraværet af megakaryocytter, et meget lille antal megakaryocytter, et lavt, medium, højt eller meget højt antal megakaryocytter. Derefter blev der i de udvalgte områder foretaget tælling af differentielle celler med et nukleotidtal (figur 1). Mindst 1000 celler blev talt. Celler blev identificeret i overensstemmelse med almindeligt accepterede standarder [2-4]. Kvantitative evalueringer af individuelle cellelinier blev udført med en stigning på × 500 og × 1000. Ifølge WHO-anbefalinger blev dysplastiske ændringer kvalitativt evalueret i 200 celler af erythropoiesis og granulopoiesis og i 30 megakaryocytter (hvor muligt) [5]. For hver patient blev slides udarbejdet ved hjælp af begge teknikker sammenlignet og evalueret, og i hvert tilfælde blev der forsøgt at analysere årsagerne til eventuelle mulige forskelle. For at undgå enhver bias forbundet med evalueringer foretaget af forskellige operatører, blev alle mikroskopiske undersøgelser udført blindt af samme person. 1 Knoglemarvsprøjt forberedt ved anvendelse af 1 (a) og 2 (b) teknikker med forstørrelse × 100 (toppen af ​​hvert billede) og forstørrelse × 400 (nederst på hvert billede)

Fordelingen af ​​de fleste variabler var unormal (Kolmogorov-Smirnov-test, p 5%, hvilket indikerer manglende cytologisk remission, blev diagnosticeret hos 12 patienter, hvor dias fremstillet ved metode 2 blev evalueret, og kun syv patienter til dias fremstillet ved anvendelse af 1. På trods af manglen på en klar stigning i blastceller i dias opnået ved anvendelse af teknik 1, blev en signifikant stigning indikeret for teknik 2 i dias af fem patienter. Numeriske værdier er præsenteret i Tabel 5. Tabel 5 Klinisk signifikante forskelle i procentdelen af ​​domæneceller i knoglemarvsaspirater indsamlet fra patienter med AL-behandlet terapi

Mikroskopisk undersøgelse af knoglemarv i lang tid forbliver en af ​​de vigtigste diagnostiske procedurer i hæmatologi. Derfor er det meget vigtigt at vide, at under undersøgelsen kan diagnoseresultater karakteristiske for forskellige sygdomme detekteres afhængigt af den anvendte diasfremstillingsmetode. Selv om vi påpegede nogle forskelle, der synes at afhænge af diasforberedelsesteknikken anvendt i alle grupper af neoplastiske hæmatopoietiske sygdomme, var det ikke alle dem klinisk signifikante. For eksempel, uanset den anvendte teknik, var lymfocytisk infiltration diagnostisk for B-CLL. Imidlertid har de kritiske værdier i de fleste af de resterende grupper af lidelser forskelle mellem resultaterne afsløret ved mikroskopisk undersøgelse afhængigt af den anvendte metode.

Evaluering af lymfocytisk infiltration i ikke-Hodgkins lymfom er altid vanskeligt for mikroskopisk undersøgelse af knoglemarven i mindst to grunde. For det første er knoglemarv infiltration ofte fokal; For det andet kan nogle lymfomceller, der stammer fra det perifere lymfesystem, bevæge sig ind i knoglemarven med blod, hvilket nogle gange tyder på infiltration i begrænset omfang. Sammenligningen viste, at metode 2 var mere anvendelig til vurdering af knoglemarv infiltration ved lymfoproliferative processer, hovedsageligt fokale karakteristika, hvilket er i overensstemmelse med offentliggjorte anbefalinger [1]. Konklusionen fra slidesne opnået ved hjælp af denne metode korrelerede bedre med resultaterne af undersøgelsen af ​​trephinbiopsier. Teknik 2 giver nogle vanskeligheder med fortolkning, især når godartede lymfocytiske aggregater er til stede i knoglemarven, som kan forekomme både i normalt knoglemarv og i knoglemarv, der er berørt af den inflammatoriske proces. Sådanne aggregater kan variere i størrelse, er godt differentieret fra de omgivende hæmatopoietiske celler og består hovedsagelig af talrige modne lymfocytter med flere lymfoide celler, histiocytter, plasmaceller og makrofager beliggende blandt lymfocytter. Frekvensen af ​​lymfoide aggregater til stede i knoglemarvsaspirater overstiger sædvanligvis ikke 20%; dog viste obduktionsundersøgelser dem i 62% af biopsierne [6, 7]. Sammensætningen af ​​celler af et sådant aggregat af lymfoide celler kan ofte angive deres natur. En høj procentdel af mere eller mindre polymorfe lymfoide former, snarere end modne lymfocytter, kan indikere ondartet infiltration. Flowcytometri er ofte citeret som en metode til at kontrollere den klonale oprindelse af sådanne aggregater [6]. Det negative resultat af flowcytometriforskning udelukker imidlertid ikke, at neoplastiske lymfoide aggregater stadig kan være til stede i knoglemarven. På grund af de ovennævnte grunde er den mest objektive metode til undersøgelse for at bekræfte fokal lymfoproliferativ infiltration i knoglemarven en trefinebiopsi [8].

I de seneste år har diagnostiske kriterier for multiple myelom ændret sig markant, og procentdelen af ​​plasmaceller i knoglemarv betragtes i øjeblikket ikke som afgørende for bekræftelse af diagnosen. Plasma celle tæller ≥30% og 10-29%, defineret som "basale" og "mindre" multiple myelom-kriterier (ifølge den tidligere WHO-klassifikation), anvendes ikke længere. Det anslås, at procentdelen af ​​plasmaceller bekræftet under den første diagnose hos de fleste patienter er ≥10%. Denne tilstand indeholder ikke ca. 10% af patienter med multiple myelom (MM) [9]. I denne undersøgelse viste vi, at forskellene i procentdelene af plasmaceller er særligt høje afhængig af fremgangsmåden til fremstilling af diasene, der anvendes i forbindelse med arten af ​​den samlede vækst af plasmaceller i knoglemarven. Således er rutinemæssige studier af patologi og brugen af ​​teknologi 2 til mikroskopiske undersøgelser fuldt berettiget. For at bekræfte diagnosen af ​​MM er det for tiden nødvendigt at påvise, at en plasmacelleklon er til stede i knoglemarven, som har brug for andre metoder, såsom flowcytometri. Flowcytometri kan imidlertid ikke betragtes som en erstatning for mikroskopisk undersøgelse [10]. Forfatterne viste, at selv om flowcytometrisk vurdering bekræfter forekomsten af ​​plasmacellekloner i knoglemarv, er procentdelen af ​​plasmaceller meget lavere end i morfologiske undersøgelser, ofte ikke over 5%. Det forekommer derfor berettiget at ikke anbefale flowcytometri til at vurdere omfanget af plasmacelleinfiltrering, som i stedet skal vurderes ved hjælp af patologiske undersøgelser eller mikroskopiske vurderinger ved anvendelse af dias opnået ved anvendelse af teknikken 2.

Fedtcellerne, som er en del af knoglemarvsstroma, er hovedsageligt lokaliseret til knoglemarvspartiklerne. Således er disse celler sjældent synlige i en afstand fra partiklerne, og hvis der er flere fjerne mastceller i et dias fremstillet ifølge fremgangsmåde 1, kan det tyde på, at det faktiske antal mastceller i knoglemarvet faktisk er meget højere. Denne stigning giver imidlertid ingen oplysninger om årsagen til denne stigning i antallet af mastceller, som kan være forbundet med en reaktiv inflammatorisk proces. Mastcelleaggregaterne lokaliseret i knoglemarvspartiklerne angiver stærkt den proliferative proces [11]. Sådanne aggregater blev observeret på de fleste slider opnået under anvendelse af teknik 2, som blev opnået fra patienter med en endelig bekræftet diagnose af SM. I skinnerne fremstillet ved hjælp af teknik 1 var det umuligt at genkende sådanne aggregater i ufordødelige knoglemarvspartikler. Med kun få mastceller til rådighed synes det ikke muligt at bestemme nøjagtigt procentdelen af ​​atypiske former, hvilket er et af kriterierne for diagnosticering af CM [12]. Derfor bør mikroskopiske undersøgelser for SM udføres ved hjælp af dias fremstillet ud fra metode 2. I dias fremstillet ved hjælp af teknik 1 var billedet af knoglemarv generelt uklart og tvetydigt, og ændringerne, der var karakteristiske for SM, blev kun observeret, når signifikant infiltration var til stede. Det skal imidlertid understreges, at trephinbiopsi fortsat er nødvendig for hver patient, der mistænkes for systemisk mastocytose.

Mikroskopisk undersøgelse af knoglemarv er absolut vigtigt for diagnosen AL, MDS og CMML. Den tidligere anvendte fransk-amerikansk-britiske klassificering kvalificerede kun disse tumorer på basis af cytologiske og cytokemiske egenskaber [13, 14]. Diagnostiske kriterier blev signifikant forbedret ved tilsætning af immunofenotyping, cytogenetisk og molekylær testning. Mange værdifulde data giver en vurdering af trephinbiopsi, som altid skal udføres, hvis myelodysplastisk syndrom er mistænkt. På trods af dette er mikroskopisk evaluering stadig afgørende for procentdelen af ​​diskriminering af domæneceller. Derudover er der ingen bedre metode til at estimere mængden af ​​en eksplosion i knoglemarven. Flowcytometrianalyse baseret på tælling af CD34 + -celler kan ikke erstatte mikroskopisk undersøgelse, fordi ikke alle eksplosive celler udtrykker CD34-antigen. Endvidere er flowcytometrianalysen stærkt afhængig af knoglemarvspådingen ved blod samt på knoglemarvsfibrose [15]. Ovennævnte begrænsninger kan føre til falsk lave procentdele af domæneceller. Den nuværende klassificering af MDS er ikke kun baseret på bekræftelse af forekomsten af ​​øget dysplasi, men også på antallet af eksplosive celler i blodet og knoglemarv. Denne sidste parameter har en signifikant prædiktiv værdi og indgår i de tre parametre, der er nødvendige for oprettelsen af ​​det internationale prognosesystem, som igen bruges til at træffe terapeutiske beslutninger [16]. Det blev konstateret, at begge glidepræparationsteknikker er lige så følsomme over for påvisning af dysplastiske anomalier. Teknik 2 er gavnlig med hensyn til evaluering af trombocytlinier: Antallet af megakaryocytter er normalt meget højere, og detaljer i form af kerne er lettere at se. Hvis dysplasiets kvalitative egenskaber er svage, og antallet af eksplosioner er den dominerende anomali, kan brugen af ​​metode 1 føre til falsk-negative resultater og vil ikke tillade at bekræfte diagnosen af ​​MDS. Forskelle i antallet af domæneceller i MDS var tilsyneladende ikke kun forbundet med fortyndingen af ​​knoglemarv med perifert blod, men også med det faktum, at eksplosionscellerne kan kombineres i klynger i knoglemarvspartiklerne. Disse partikler er tydeligt synlige i trefinbiopsi undersøgelser, normalt i mere avancerede former for MDS [15]. Derfor mener vi, at teknik 2 er mere pålidelig til diagnosticering af MDS og korrelerer bedre med det kliniske billede af patienterne.

Klinisk signifikante forskelle i begge metoder til knoglemarvspreparation er ofte forbundet med akut leukæmi forbundet med multilevel myelodysplasi eller med sekundære leukæmier. Ofte anerkendes myelodysplastisk syndrom som angivet i skinnerne opnået under anvendelse af teknik 1 som akut leukæmi i dias opnået i overensstemmelse med fremgangsmåde 2. Under hensyntagen til muligheden for domænecellefokalvækst for at etablere en knoglemarvshyperplasi-subtype (MDS eller AML), det er tilrådeligt at anvende den højeste procentdel af blastceller fra dias opnået ved hjælp af teknik 1 eller teknik 2. Denne tilgang vil opfylde kriterierne for anerkendelse af domænecellernes krise i kronisk myeloid leukæmi [17].

Overvågning af effekten af ​​kemoterapi på akut leukæmi kræver sandsynligvis de mest nøjagtige diagnostiske metoder, der hovedsageligt er baseret på immunologi og / eller molekylære metoder. Mikroskopisk undersøgelse har mistet sin betydning, da det normalt ikke giver den nøjagtighed, der kræves af mange moderne terapeutiske regimer. I vores undersøgelse viste vi, at en knoglemarvsvurdering ved hjælp af teknik 1 viste remission, hvorimod en undersøgelse udført i dias fremstillet ved metode 2 udelukkede remission. Flowcytometriundersøgelser skal indikere en eksplosionsmængde svarende til indikationer opnået ved anvendelse af teknik 1. Det skal huskes, at når der træffes terapeutiske beslutninger, har flowcytometri sædvanligvis en tendens til at detektere et lavere antal domæneceller end faktisk kunne være.

De fremlagte resultater bekræfter, at mikroskopisk undersøgelse af knoglemarv hos patienter med en af ​​flere neoplastiske hæmatopoietiske lidelser kan give forskellige resultater afhængigt af den metode, der anvendes til fremstilling af diasene. Mange af de signifikante symptomer, der let ses i dias fremstillet ved hjælp af teknik 2 (for eksempel infiltrering af fokal lymfocytter eller mastceller) kan ikke observeres i dias opnået ved anvendelse af teknik 1. På den anden side i visse specifikke situationer (f.eks. fleecy lymfeceller), kan metode 1 bedre bevare morfologien af ​​en enkelt celle. Derfor støtter vi fuldt ud ICSH-retningslinierne, hvori det hedder, at mikroskopisk undersøgelse skal udføres ved hjælp af dias udarbejdet ved hjælp af en hvilken som helst af disse teknikker. Vi mener, at teknik 2 er mere fordelagtig sammenlignet med teknik 1. Derudover korrelerer resultater opnået ved anvendelse af dias opnået ved hjælp af metode 2 bedre med resultaterne af det kliniske billede og studiet af trephinbiopsien. Derfor anbefaler vi at bruge metode 2 som den vigtigste metode til at etablere en diagnose eller træffe terapeutiske beslutninger baseret på mikroskopisk undersøgelse af knoglemarv.

Interessekonflikt Forfatterne erklærer ikke en interessekonflikt.

Åben adgang Denne artikel er distribueret under en ikke-kommerciel Creative Commons Attribution-licens, som tillader ikke-kommerciel brug, distribution og reproduktion på ethvert medium, forudsat at originalen (er) og kilden krediteres.

Hvad er knoglemarvspunktur taget for, og hvad viser analysen?

Knoglemarvspunktur er en diagnostisk metode, der bruges til at overvåge eller identificere sygdomme, der påvirker blod- og hæmatopoietisk system. Punktering bruges også til at udelukke eller bekræfte anæmi, leukæmi og andre hæmatologiske sygdomme. Undersøgelsen af ​​knoglemarv er tildelt på basis af fysisk undersøgelse og patienthistorie. I artiklen vil vi undersøge, hvad det er - knoglemarvspunktur.

Hvad er knoglemarvspunktur?

Før udførelse af proceduren skal blæren og tarmene tømmes, og andre diagnostiske undersøgelser eller kirurgiske procedurer anbefales ikke på dagen for punktering.

Knoglemarven består af stamceller, som er store udifferentierede celler. Der er to hovedtyper af stamceller, og derfor består knoglemarven af ​​to typer cellevæv. En type er involveret i produktion af blodceller, og den anden i produktionen af ​​stromaceller.

Benmargsaspiration anvendes hovedsageligt til at bedømme morfologi og opnå et differentieret celleantal. Materialet opnået under aspiration kan studeres ved cytogenetiske, molekylære, mikrobiologiske, immunhistokemiske og cytometriske metoder.

En biopsi og efterfølgende histologisk undersøgelse gør det muligt at vurdere knoglemarvets samlede cellularitet, identificere fokale læsioner og bestemme infiltrationsgraden af ​​forskellige patologiske mikroorganismer.

Patienter er interesserede: hvor kommer knoglemarven fra? Under punktering fjernes knoglemarven med en særlig nål fra bækkenbenet eller brystbenet. Forskellige stadier af modenhed af blodceller kan detekteres i laboratoriet. Ved hjælp af myelogram er det muligt at identificere sygdomme i blodet eller hæmatopoietisk systemet.

Benmargsprøver kan opnås ved aspiration eller biopsi. Prøven opnået ved aspirationsmetoden er semi-fluid, derfor kan den undersøges af en patolog under et lysmikroskop og analyseres ved hjælp af flowcytometri, cytogenetiske, kromosomale analyser og polymerasekædereaktion (PCR).

Trepanobiopsy er en type punkteringsbiopsi, hvor der er taget fast knoglemarvvæv. Prøven kan anvendes til immunhistokemisk analyse. En benmarg trepanobiopsy bruges oftest til at afklare hoveddiagnosen.

vidnesbyrd

Benmärgs punktering sker i tilfælde af at lægen har en mistanke om en sygdom i blodet og hæmatopoietisk systemet.

  • Diagnose eller overvågning af anæmi, leukæmi, knoglemarv aplasi;
  • Diagnose af knoglemarvsmetastaser (spredning af tumorer fra andre organer);
  • Opnåelse af stamceller til transplantation.

Leukæmi er den mest almindelige knoglemarvs sygdom. Udtrykket "leukæmi" indbefatter forskellige maligne sygdomme, som alle er ens, idet de er afledt af forstadierne af lymfocytter. Disse ændrede celler spredes gradvist gennem det røde knoglemarv, hvilket påvirker den normale dannelse af blod. De går også ind i blodbanen, hvorfra de invaderer lymfeknuderne, milt, lever og andre indre organer. Desuden forårsager manglen på funktionelle blodlegemer anæmi hos patienter.

Kontraindikationer

Når dekompenseret form for diabetes mellitus punktering af knoglemarven ikke anbefales.

Der er flere kontraindikationer til knoglemarvsundersøgelse. Den eneste absolutte grund til, at undersøgelsen ikke kan udføres, er forekomsten af ​​alvorlige blødninger, da blødning kan forekomme efter proceduren.

Hvis en alvorlig infektion har udviklet sig i hoftefugen, skal der vælges et andet sted til undersøgelse. Benmargsaspiration og biopsi kan udføres uden risiko selv ved ekstrem trombocytopeni (lavt antal blodplader).

Mulige komplikationer

En skarp punktering kan forårsage alvorlig smerte. Denne korte og skarpe smerte stopper hurtigt; det kan også reduceres med passende smertestillende midler. Desuden kan knoglemarvspunktur i sjældne tilfælde forårsage følgende komplikationer:

  • Blødning og infektion ved punkteringsstedet;
  • Traume og betændelse i tilstødende organer og vævsstrukturer
  • Respiratoriske eller kardiovaskulære sygdomme med indførelsen af ​​beroligende midler eller analgetika.

Ved punktering - som med andre undersøgelser og behandlingsprocedurer - kan der forekomme potentielt uønskede komplikationer. Mange patienter kan være bekymrede for alvorlige smerter på grund af punktering. Konsekvenserne af uforklarlige sygdomme kan imidlertid være mere alvorlige end smerten fra proceduren.

Andre negative virkninger er:

  • Hæmatomer og brystformer;
  • Sepsis (blodforgiftning);
  • Perforeringer og skader (tilstødende organer, nerver, blodkar).

Knoglemarven kan punkteres på ambulant eller indlæggelsesbasis (i Institut for Intern Medicin, Hematologi, Onkologi). Afhængigt af situationen er høring eller instruktion fra den behandlende læge påkrævet.

Fremskridt i proceduren

Paracetamol eller andre analgetika kan tages for at lindre smerte i flere dage.

Aspiration punktering udføres først. En sugepind indsættes gennem huden med hånden indtil den når benet. Så føres nålen gennem periosteumet (stift ydre lag af knogle) ind i hjernehulrummet. Så snart nålen kommer ind i knoglemarvets aspirat, tages væske. Dette kræver en vis præcision i doktors bevægelser under proceduren for at undgå forhøjet blodindhold i prøven.

Hvis aspiration punktering ikke er nok, udføres en biopsi i knoglemarvområdet. En stor nål bruges, som er placeret og sikret i knoglemusklen. Så indsættes nålen i en vridningsbevægelse og drejes for at opnå et fast stykke knoglemarvstof. Den resulterende prøve fjernes fra patienten sammen med nålen. Procedurens varighed kan være fra 10 til 15 minutter.

Hvis en malign ændring i knoglemarven er mistanke, kan der også udføres en slagbiopsi. I laboratoriet kan det fjernede væv skæres, farves og undersøges under et mikroskop. Ofte udføres punchbiopsien hos børn.

Efter at have fuldført proceduren bliver patienten normalt bedt om at lægge sig i 5-10 minutter. Derefter, hvis der ikke er blødning, kan patienten stå op og vende tilbage til deres daglige aktiviteter. Paracetamol eller andre simple analgetika kan tages af patienten for at lindre smerter i 2-3 dage. Enhver forværring af smerte, rødme, feber, blødning eller hævelse kræver lægehjælp. Patienterne rådes til ikke at vaske det punkterede område i 24 timer for at undgå infektion.

Forberedelse til undersøgelsen

Lægemidler, der påvirker blodbanen, bør stoppes en uge før proceduren.

Knoglemarvspunktur er en kort ambulant procedure. Hjertefrekvens, blodtryk og andre værdier vil blive overvåget i en time af din læge. Hvis patienten fik smertestillende eller beroligende middel før proceduren, er det forbudt at køre bil for en dag. Det er altid nødvendigt at konsultere en læge først for at undgå mulige konsekvenser af proceduren. Lægen vil fortælle dig hvilke stoffer eller foranstaltninger der ikke anbefales før proceduren. Nogle gange kan det være meget smertefuldt under proceduren. Normalt bør svær smerte være fraværende.

Før punkteringen spørger lægen patienten om de eksisterende sygdomme og lægemidler, der blev taget dagen før. Hvis patienten bruger stoffer, der tynder blodet, skal du informere din læge. Aspirin og andre lægemidler, som påvirker blodbanen, skal stoppes en uge før proceduren.

resultater

Hvad viser knoglemarvspunktur? Undersøgelsen af ​​knoglemarvspunktet anvendes til at identificere mange sygdomme, herunder: leukæmi, multiple myelom, lymfom, anæmi og pancytopeni. Meget information om blodet kan opnås gennem rutinemæssig forskning - generelle eller biokemiske blodprøver. For at kende årsagen til sygdomme er det dog nogle gange nødvendigt at undersøge kilden til blodlegemer.

Under aspiration er ikke alle blodlegemer altid synlige; i nogle situationer - for eksempel i lymfom - agglutinerer cellerne i benens trabekulae og ikke i sinusoiderne, så de ikke indsamles eller er ikke synlige i knoglemarvsanalysen.

Pris hvor gør

Den gennemsnitlige pris for knoglemarvspunktur i Moskva og Moskva-regionen er 500 russiske rubler. Myelogram - undersøgelsen af ​​knoglemarvspunktet - koster omkring 2500 rubler. Prisen på mange undersøgelser afhænger af en bestemt privat klinik eller det kommunale hospital. Det anbefales derfor at angive de endelige omkostninger direkte på lægecentret.

Moderne muligheder for diagnose af knoglemarvskader i ikke-Hodgkins lymfomer på trepanobioptatmateriale

Forfattere: E.V. Chigrinova, A.I. Pavlovskaya GU RCRC dem. NN Blokhina RAMS, Moskva

Knoglemarvets inddragelse (KM) i perifere nehodkin lymfomer (NHL) er en af ​​de regelmæssige faser i løbet af denne gruppe af sygdomme. De vigtigste indikationer for undersøgelsen af ​​CM i NHL kan formuleres som følger:

  • etablering af scenen i den første diagnose af lymfom;
  • vurdering af procesens dynamik under behandlingen
  • vurdering af kvaliteten af ​​fritagelse
  • kontrol med fuldstændig remission
  • cellularitetsvurdering KM.

NHL benmarg invasion kan etableres på forskellige diagnostiske niveauer, fra lysmikroskopi til molekylære biologiske test. For alle typer studier er der både ret klare kriterier for identifikation af den neoplastiske lymfoide population og objektive begrænsninger af muligheder. Som det er kendt, er der to hovedtyper af KM-materiale under undersøgelse - aspirat (native cellesuspension) og trepanobioptat (osteomedullær cylinder). Knoglemarvsaspirat er en cellesuspension, så giver kvalitativ og kvantitativ karakterisering af cytologiske hæmatopoietiske celler, samt at undersøge immunfænotype nogen normale og patologiske celledelmængder ved flowcytometri (HRC). Formålet med trepanobiopsy er et komplekst morfologisk studie, der tillader, ud over den hæmatopoietiske egenskab, at opnå information om tilstanden af ​​knogle- og stromvæv. Formålet med denne publikation var et forsøg på en tilgængelig udstilling af essensen af ​​moderne metoder til at studere CM på trepanobioptatniveauet.

Biopsi kan mere fuldt ud at vurdere strukturen af ​​kabinettet (tilstedeværelse eller fravær i det af lymfoid infiltration, arten af ​​dets fordeling i CM og navnlig placeringen af ​​lymfoid infiltration i forhold til bjælkerne lamellar knogle), og tilstanden af ​​hæmatopoiese i almindelighed er forholdet mellem fedt og hæmatopoietisk væv, cellularitet af sidstnævnte, til at karakterisere og knogle stroma KM bjælker, især distributions- og sværhedsgraden retikulinovyh og collagenfibre, aktiviteten af ​​osteoblaster og osteoklaster bredde mezhbalochnyh n hulrum mv I fravær af teknisk utilgængelighed eller ekstramedullære arne lymfom læsioner kan ingen patologiske lymfocytose i aspirat trepanobioptate CM CM være den eneste kilde til diagnostisk materiale. Årsagerne til fraværet af lymfomceller i aspirat kan indbefatte en ekstremt lille antal celler af den leukæmiske klon sværhedsgraden af ​​sklerotiske forandringer i lymfom foci og ekspression lymfom celleadhæsionsmolekyler (MA), som på den ene side, til formidling giver tropisme for hæmatopoietiske væv og stroma KM, og på den anden - bestemme styrken af ​​intercellulære og celle-stromale kontakter [1]. Adhæsin der leverer tilsvarende intratkanevye interaktioner falder i tre overfamilier: immunglobuliner - ICAM-1, CD54, integrin - L (CD11a / LFA-1a), X (CD11), 4 (SD49d / VLA-4), 1 ???? (CD29), 2 (CD18), 3; såvel som selektiner - L-selektin (CD62L), P-selektin (CD62P). Dette er selvfølgelig ikke hele listen over MA'er, der kan bestemme typen af ​​formidling af NHL med organspecifik tropisme. I litteraturen fra de seneste år er emnet af disse typer af MA imidlertid forbundet med involvering af CM og funktionerne i arkitektonikken af ​​lymfomfoci i den [2]. PJ Lucio et al. [3] beskriver forholdet af ekspression af CD11a, CD11c, CD18, CD29, CD44, CD49d, CD54, CD62L nosologiske udførelsesform med NHL og aggressiv flow. Et af de interessante resultater af deres arbejde var antagelsen om, at det er muligt at klassificere NHL generelt såvel som individuelle subtyper inden for hver nosologi, i overensstemmelse med den immunologiske profil af MA-ekspression. E. Horst et al. [4] tilvejebringer en sammenlignende vurdering af ekspressionsniveauet af CD44-molekylet under normal B- og T-differentiering og forskellige stadier af NHL. Ifølge deres data svarer udtrykket af CD44 til lymfomer med stor risiko for leukemisering, og ekspressionsgraden af ​​dette molekyle stiger med progressionen af ​​NHL. M. K. Angelopoulou et al. [5] karakteriserer også den immunologiske profil af MA-ekspression i forskellige NHL'er, hvor CD44 og CD56 fremhæves som de vigtigste risikofaktorer for CM-beskadigelse i NHL.

Således er der faktorer, der på den ene side bidrager til NHL leukemisering, og på den anden side kan de være en hindring for lymfomceller for at komme ind i KM aspiratmaterialet. Under disse omstændigheder kan trepanobioptat CM være det eneste CM-emne til undersøgelsen af ​​leukemisk substrat.

Det konstateres, at en højere frekvens påvirkes knoglemarv for B-celle lymfom, low-grade [6], som i overensstemmelse med klassifikationen af ​​tumorer af hæmatopoietiske og lymfoide væv WHO [7] omfatter lymfomer af den modne form af små celler:

  • lille lymfocyt lymfom / B-celle kronisk lymfatisk leukæmi;
  • mantelcellelymfom;
  • nodal lymfom marginale zone;
  • extranodal MALT-type og marginal zone af milten;
  • follikulært lymfom;
  • lymfoplasma lymfom.

Morfologisk analyse

Effektiviteten af ​​trepanobioptata-forskning er i høj grad afhængig af biopsiets tilstrækkelighed. Sidstnævnte skal ifølge nogle forskere være fra 2 til 3 cm lange (mindst ikke mindre end 1,5 cm) og indeholde mindst 5 eller 6 mellemrumgede hulrum [8, 9]. Dette skyldes det faktum, at CM-cellernes mobilitet kan være forskellig i forskellige intergullyhulrum. Det kan ikke pålideligt vurderes for et lille fragment af CM, især i tilfælde, hvor materialet er repræsenteret af en subkortisk zone, dvs. område placeret under den kortikale knogle. Denne zone er som regel lille celle, især hos ældre. Desuden er jo flere intergullyhuler, der er til stede i biopsien, jo større er sandsynligheden for at detektere fokale læsioner af CM. Succesen med trepanobioptata-forskning er uden tvivl også afhængig af, om alle stadier af dets behandling er tilstrækkelige: fiksering, afkalkning, hældning og fremstilling af histologiske sektioner. I de senere år har forsøg på metodisk forbedring af hver CM bearbejdningstrin, som dikterede primært bred indføring i de diagnostiske proces immunhistokemiske teknikker, navnlig for at bestemme arten og karakteren af ​​lymfoid infiltration i CM. For eksempel er der foreslået fremgangsmåder til hældning af biopsiemateriale i methacrylatharpikser uden forudgående afkalkning [10, 11]. på samme tid, det understreger dog, at disse metoder er for dyrt og tidskrævende, og gode resultater, herunder immunhistokemi, kan opnås ved nøje overholdelse af alle regler og krav i standarden histologiske metode [11].

De vigtigste indikationer for trepanobiopsy KM er:

  • mistænkt lymfom
  • etablering af lymfom histotype;
  • bestemmelse af stadium af tumorskader i alle stadier af den terapeutiske og diagnostiske proces
  • overvågning af resultaterne af behandlingen med henblik på at detektere remission, delvis remission, tumorgengivelse mv.


Påvisning af lymfoid infiltration i CM er ikke identisk med hans lymfom læsion. KM indeholder normalt lymfoide celler, som kan tegne sig for op til 15-20% af hele populationen af ​​KM-nucleerede celler. Disse er modne celler og stamceller fra T og B lymfoide linjer. Blandt modne celler er T-lymfocytter flere talrige, og B-lineære celler dominerer blandt stamceller. Lymfoide celler kan placeres mellemliggende, mellem elementerne i hæmopoiesis, og kan være i form af små klynger - lymfoide knuder. Forøgelsen i antallet af lymfoide celler kan være både absolut og relativ på grund af reduktionen af ​​hæmatopoiesen, for eksempel under hypoplastiske betingelser. Godartede lymfoide knuder kan detekteres i nogen KM, men ofte de findes i ældre, kvinder, på nogle hæmatologiske og ikke-hæmatologiske sygdomme, såsom rheumatoide sygdomme [8], i tilfælde af cytomegalovirus infektion, toxoplasmose, infektiøs mononukleose og andre infektioner med posttransfusionssyndrom [12-14] osv.

Fire typer af godartede lymfoide knuder er beskrevet [15, 16]: den første - med germinal center; den anden - med klare grænser; den tredje - med uregelmæssige ujævne konturer; den fjerde - i form af små klynger af lymfoide celler. Foruden lymfoide celler indeholder de sædvanligvis plasmaceller, histiocytter, kapillærer, undertiden eosinofiler og mastceller samt et reticulinnetværk. De kan være flere, er som regel intertrabeculære. Påvisning af selv minimal lymfominfiltration er kendt for at være en indikator for tumorgeneralisering og kan derfor være vigtig for prognosen og planlægningen af ​​terapi [17]. Derfor spørgsmål præciserer arten af ​​lymfoide infiltration, differentialdiagnosen mellem lymfoide infiltration af godartet natur og lymfom læsion af KM er meget vigtige, men på samme tid, og en af ​​de mest vanskelige, og ikke altid kun løses ved histologisk undersøgelse, og kræver brug af immunhistokemi, molekylærbiologiske, genetiske metoder.

De vigtigste histologiske kriterier, der anvendes til differentialdiagnose af lymfom læsion CM og godartet lymfoid infiltration og for subklassifitsirovaniya lymfom CM er for det første, topografiske træk lymfoid infiltration og for det andet, morfologiske (nukleare og cytoplasmiske) karakteristika infiltrere celler.

Der er 3 hovedtyper lokalisering af lymfoid tumorinfiltration i knoglemarven: interstitiell, brændvidde og diffus [8] (figur 1).


Fig. 1. Skematisk repræsentation af typer nederlag KM i NHL [8]

I interstitial typen er lymfoidcellerne placeret mellem CM-cellerne uden at forstyrre sin normale arkitektur og hæmatopoiesis (figur 2).


Figur 2. Interstitiel type læsion i B-CLL. Farvet med hæmatoxylin og eosin, HC. 250

Med diffus type bemærkes massiv lymfoid infiltration, fylder hele eller næsten hele interglobe rummet med en skarp reduktion eller fuldstændig udskiftning af fedt og hæmatopoiet væv. Fokal type lymfoid infiltration er karakteriseret ved tilstedeværelsen af ​​foci, oftest flere. Foci kan være lokaliseret intertrabeculært og / eller paratrabeculært. Paratrabekulær lokalisering kan have form af et lag lymfoide celler af forskellig bredde og længde tæt tilstødende på trabekulae med tegn på stromal sclerose eller en læsion liggende på knogle trabecula med dens brede base (figur 3).


Fig. 3 Paratrabekulær vækst af tumorinfiltration i follikulært lymfom. Farvet med hæmatoxylin og eosin, HC. 200

Fokuserne på lymfoid tumorinfiltration kan være placeret i de centrale dele af det interstitielle hulrum, dvs. intertrabecular. De kan være i form af en knude (figur 4) med et center (oftere uden det) af reproduktion eller en læsion med uregelmæssige, dårligt konturerede grænser.


Fig. 4. Fokal læsion af CM i lymfom i marginalområdet. Farvet med hæmatoxylin og eosin, HC. 200.

En stor læsion kan være tilstødende i en kort afstand til trabeculae, men denne type lokalisering af lymfomfokus er ikke paratraculær. En variation af interstitiel infiltrationstypen er den intrasinusoidale lokalisering af tumorceller (figur 5) [8, 18].


Fig. 5. Intrasinusoidal lokalisering af tumorlymfocytter. Immunohistokemi, farvning på CD20

Beskriver en anden type lymfom infiltration CM - enkeltcelle-dispersion med tilstedeværelsen af ​​enkelte celle lymfom blandt hæmatopoietiske celler som minimalt udtrykt tipa.Imeyut interstitielle rum kombinationer af forskellige typer af lymfoid infiltration lokalisering udgør den blandede type. For eksempel interstitial-diffus, interstitial-nodular, interstitial-intrasinusoidal [8, 11]. Under hensyntagen til topografi af lymfominfiltration, morfologiske (nukleære cytoplasmatiske) egenskaber hos tumorceller og tilstedeværelsen eller fraværet af tegn på myelofibrose i de berørte områder er der udviklet en algoritme til subklassificerende lymfomer i CM. Tilstedeværelsen af ​​kun paratrabukulær lymfominfiltration muliggør uden tvivl at tale om follikulært lymfom. Follikulært lymfom er også kendetegnet ved en blandet infiltration, herunder interbakterielle foci, men med den uundværlige tilstedeværelse af paratrabecular lokalisering. Den interstitielle vækst af lymfomceller er meget sjælden, og den diffuse type findes næsten ikke. Infiltrater består overvejende af celler svarende til centrocytter af forskellige størrelser, med enkeltceller af centroblast typen. Den overvejende cellulære sammensætning i CM er type 1 follikulært lymfom. Ofte falder billedet af follikulært lymfom i lymfeknude ikke sammen i cellesammensætningen med billedet observeret i CM. Dette fænomen kaldes uoverensstemmelse. Et karakteristisk træk ved follikulært lymfom i CM er myelofibrose, som observeres i områder med lymfomskader uden tegn på forstyrrelse af CM's normale arkitektur.

Små tricks paratrabekulyarnoy infiltration kan forekomme i mantlecellelymfom og lymfoplasmacytisk lymfom, men at udelukke lymfom, lille lymfocytisk / B-kronisk lymfatisk leukæmi. For lymfoms lymfom er interstitielle og fokale interstitiale typer af vækst af lymfomceller typiske [19]. Sidstnævnte er en blanding af homogene celler af små og mellemstore størrelser med uregelmæssige skitser af den nukleare membran. Somme tider har celler en centrocytoidmorfologi, hvilket kan øge ligheden med follikulært lymfom. Imidlertid findes ikke store celler med strukturen af ​​centroblaster eller immunoblaster. Tilstedeværelsen af ​​histiocytter med lys cytoplasma uden tegn på fagocytose er mulig. Myelofibrose er ikke karakteristisk. For lymfoplasmacytisk lymfom er interstitielle, fokale interstitiale og diffuse væksttyper af tumorceller typiske. Paratrabukulær lokalisering forekommer, men ekstremt sjældent [18]. Diagnose af lymfoplasmocytisk lymfom baseret på lokalisering af lymfominfiltrat alene er umuligt. Den afgørende rolle spilles af en detaljeret karakterisering af den cellulære sammensætning, som er repræsenteret af celler som små lymfocytter, plasma- og lymfoplasmacytoidceller, såvel som et lille antal immunoblaster, plasmablaster. Hyppig er myelofibrose, fokal eller diffus, uden at forstyrre den normale arkitektur [14].

Med interstitiel og / eller diffus type infiltration med eller uden foci dannelse er der først og fremmest en mistanke om lymfom fra små lymfocytter / B-celle kronisk lymfocytisk leukæmi. Tilstedeværelsen pseudofolliculitis i tilfælde af overvejende diffus typen tumorvækst, især den cellulære sammensætning af infiltratet (små celler med rund kerne, chromatin lumpy) tillade at bekræfte den påståede histotype lymfom. Myelofibrose for lymfom fra små lymfocytter / B-kronisk lymfocytisk leukæmi er ikke typisk.

Lymfom i miltens marginale zone, med eller uden cirkulerende vaskulære lymfocytter, er kendetegnet ved fokal inter-bakteriel eller diffus infiltration af CM-tumorceller. Lokalisering af lymfomceller inde i knoglemarvs bihul betragtes som karakteristisk [20-22]. Denne type infiltration kan forekomme i andre typer lymfomer [18], men i tilfælde af dets overvejende karakter kan diagnosen lymfom i miltens miltzone laves med høj sandsynlighed. Lymfom i marginalzonen af ​​nodal og extranodal MALT-typen involverer sjældent CM, men i tilfælde af dets nederlag finder en interstitial-brændvidde infiltration sted. Foci af stor størrelse kan relateres til knogle trabeculae, nogle af læsionerne kan ligne lymfoide follikler, have avlcentre og en bred marginal zone bestående af celler med monocytoid morfologi. I cellepræparatet er der lymfoide celler af lille og mellemstørrelse med afrundede kerner, moderat bredde af lys cytoplasma, såvel som et andet antal plasmaceller, et lille antal aktiverede lymfoide celler. De aggressive varianter af perifere ikke-Hodgkin B-celle lymfomer - diffus celle lymfom og Burkitt's lymfom - er primært karakteriseret ved den diffuse type vækst af tumorceller i CM.

CM-nederlaget i perifere T-celle lymfomer er mindre almindeligt end i perifer B-celle [23]. Perifere T-celle lymfom histotyper er:

  • uspecificeret;
  • angioimmunoblastisk;
  • anaplastisk storcelle og kutant T-celle lymfom.

Frekvensen af ​​KM læsioner i perifere T-celle lymfomer er meget variabel, ligesom typerne af lymfom substrat lokalisering. Funktionerne i perifere T-celle lymfomer indbefatter deres evne til at forårsage markante sekundære ændringer i form af vaskulær proliferation, granulomatøs reaktion, eosinofili, myelofibrose etc. Et af de vigtige problemer i kontrollen af ​​destruktion af KM perifert T-celle lymfom er en differentialdiagnose med T-celleproliferativ reaktiv art, som opstår i tumorsygdomme, såsom småcellede B-celletumorer, klassisk Hodgkin lymfom, nodulær lymfoide overvægt Hodgkins lymfom, myelodysplastiske syndromer diffunderer stort B-celle lymfom, der er rigt på T-celler og / eller histiocytter såvel som i ikke-tumorstilstande: autoimmune sygdomme såsom rheumatoid arthritis og polymyalgi, en række virale og bakterielle infektioner mv. [23].

Fortolkningen af ​​histologiske oplysninger er ikke altid enkel, og i de fleste tilfælde er en korrekt diagnose baseret på histologisk undersøgelse alene umulig. Et tæt samarbejde mellem histopatologen og hæmatologen er omfattende brug af yderligere forskningsmetoder, såsom immunophenotyping og i nogle tilfælde molekylær biologisk og genetisk analyse.

immunofænotypebestemmelse

Trepanobioptum CM (osteomedullary cylinder) er en heterogen materialetæthed: knoglekomponenten er et tæt stof, hæmatopoietisk væv er et løs halvflydende stof. Til udførelse af immunologiske reaktioner er det nødvendigt at forberede ultratynde sektioner, der kræver at alle histologiske komponenter bringes til en ensartet tæthed. Dette kan opnås enten ved blødgøring af knoglestrukturerne eller ved komprimering af selve hæmopoietisk væv. I det første tilfælde udføres knogleafkalkning, den anden effekt kan opnås ved at hælde materiale i opløsninger baseret på methacrylatharpikser eller frysning ved lave temperaturer (op til -700 ° C) i særlige blandinger, og begge metoder kræver ikke en afkalkningsproces [24, 25]. Frysning af trepanobiopater materiale er ideel til bevarelse af antigeniske determinanter, mens anvendelsen af ​​methacrylatharpikser tillader opnåelse af histologiske præparater af fremragende kvalitet [10, 11]. For øjeblikket er fremgangsmåden til afkalkning for tiden som nævnt mest anvendt i rutinemæssig praksis efterfulgt af hældning af materialet til paraffin. Valget af metode skete som et resultat af historisk udvælgelse under hensyntagen til økonomisk gennemførlighed og teknisk tilgængelighed.

Uanset den histologiske protokol, der anvendes til at fylde materialet, udføres materialets immunologiske farvning i overensstemmelse med et enkeltprincip, som er baseret på reaktionen af ​​antigenet af interesse - et monoklonalt antistof. Den type histologiske præparation af en trepanobiopta kan kun påvirke typen af ​​farvestof, med hvilken en positiv reaktion kan læses af en morfolog. Således er anvendelsen af ​​fluorescerende farvestoffer optimalt til kryostatskæringer, for et materiale, der er indlejret i paraffin- eller methacrylatharpikser, er chromogener synlige på niveauet af lysmikroskopi. Udviklingen af ​​immunologiske metoder til undersøgelse af materialet af trepanobioptater af CM har ført til valget af en immunoenzymatisk metode (immunhistokemi - IHC) på paraffinsektioner af CM som den primære. Af klarhed kan du sammenligne alle farvemetoder (se tabel).

Tabel. Sammenligning af forskellige farvningsmetoder afhængigt af protokollen til behandling af materialet trepanobiopta KM

I laboratoriet for hemopoiesisimmunologi af det russiske kræftforskningscenter blev alle de fremlagte metoder testet. Der gives fortrinsret til IHH i kombination med immunofluorescens på paraffinsektioner [26, 27]. Det er indlysende, at immunofenotipirovanie trepanobioptate KM - en proces teknisk vanskeligt og økonomisk dyrt og kræver derfor en veldefineret indikationer for.

Generelt er NHL-hovedopgaverne af immunofenotyping af CM:

  • påvisning af neoplastisk lymfoid infiltration;
  • differentiel diagnose af forskellige lymfomer;
  • differentiel diagnose med reaktive processer.

Prioriteten i løsningen af ​​opgaverne skal selvfølgelig gives til den moderne flow-cytofluorimetri af KM-aspiratet. Indikationerne for immunhistokemiske studier af trepanobioptater KM i NHL er endnu mere smalle. Undersøgelsen skal udføres:

  • når patologisk lymfoid infiltrering af CM detekteres, og der er ingen mulighed for aspireret flowcytofluorimetri;
  • i tilfælde af mangel på pålidelig celle aspirat eller lav procent af den samlede lymfocytter i lymfom, højfrekvente forskellige KM læsioner;
  • som en del af en omfattende undersøgelse af CM med CD5-negative varianter (follikulær, alle varianter af lymfomer i den marginale zone);
  • til differentialdiagnosen af ​​reaktiv og tumorplasmacytose med en lav procentdel af plasmaceller i aspiratet;
  • i alle tilfælde, detektion af kun det materiale trepanobioptate KM lymfoid infiltration, mistanke om tumor.

I T-celle NHL bør præference også gives til QC, da coexpression af antigener betragtes som diagnostisk for de fleste lymfomer. Derudover er der vanskeligheder ved anvendelsen af ​​antistoffer mod β- og β-celle receptorer, som bestemmer klonaliteten af ​​neoplastiske T-lymfocytter på paraffinsektioner af CM. Omfattende undersøgelser immunomorphological trepanobioptate af alle T-NHL kræver lineær anaplastisk storcellet lymfom (CLA), da det udmærker sig ved en unik type knoglemarv invasion - en monodispersion individuelle celler mellem elementer af hæmatopoiese, som kun kan bestemmes ved immunohistokemi. Ifølge verdensdata er procentdelen af ​​leukemisering af denne variant ca. 30, mens undersøgelsen af ​​KM aspirat som regel ikke er informativ [28-30]. For eksempel i arbejdet af A.I. Slugina [31], der er dedikeret til storcellelymfomer hos børn, blev ikke påvist i et af KM aspiraterne fra to punkter af CM-beskadigelse hos en af ​​18 børn med AKL-diagnose, der blev fastlagt på grundlag af morfoimmunophenotyping af knudepunkter og extranodale læsioner.

M. Fraga et al. [32] under rutinemæssig histologisk undersøgelse af biopsiprøver, fandt CM skade på kun 17% af patienterne og under yderligere immunhistokemisk farvning ved anvendelse af monoklonale antistoffer mod CD30 og epithelial membran antigen (EMA) - hos 23% af patienterne. I alle 42 tilfælde inkluderet i deres arbejde var der en spredning af enkelttumorelementer mellem normale hæmatopoietiske celler og adipocytter. Lignende histologiske træk ved knoglemarvsinvasion af AKL er også beskrevet i værkerne af Y. Sadahira et al. [16] og C. Bayle et al. [33].

Hvad angår B-NHL, er den objektive diagnostiske værdi af immunofenotypen af ​​trefinebiopsiprøver af CM ikke den samme for forskellige varianter, derfor kan de vigtigste diagnostiske evner af fremgangsmåden tydeligere præsenteres i overensstemmelse med nosologier. For eksempel B-celle lymfatisk leukæmi / lymfom af de små lymfocytter (B-CLL / LML) og behårede lymfocytisk tilsætning udtalt immunfænotypiske egenskaber har et stort potentiale leukemization (> 90%), hvilket afspejles i en stabil udseende patologisk lymfocytose i aspirat KM [7, 8, 14]. Kompleks Immunomorfologichesky undersøgelse aspirat hjælp af en PC kan betragtes som en fundamental, da kun PC muliggør anvendelse af dobbelt og tredobbelt fluorescensmærkning også vurdere diagnostisk markør coekspression: CD23 og CD5 i B-CLL / LML og CD103 og CD25 på ON for CD19 overflade + lymfocytter [34, 35].

Behovet for trepanobiopsy med et fuldt leukemisk billede af perifert blod og aspirat CM er ikke helt klart. Hvis nogle forfattere i tidligere års litteratur hævder den prognostiske værdi af forskellige typer CM-infiltration i B-CLL [36, 37], afviser andre det senere [38, 39]. Derefter blev der påvist mere pålidelige tegn på tumorens biologiske aggressivitet, såsom tilstedeværelsen af ​​somatiske hypermutationer i generne, som koder for de variable regioner af tunge kæder, ekspression af CD38-molekylet og et højt niveau af p2-microglobulin [40,41].

Mantelcellelymfom (LKM)

Nederlaget for CM med LKM forekommer hos ca. 75-80% af patienterne [42-48], og i modsætning til B-CLL findes den leukæmiske fase af perifert blod kun hos 50% af patienterne. P.L. Cohen et al. [49] beskrev den højeste procentdel (93) af CM skade i mantel zone lymfom på materialet hos 46 patienter. Forfatterne forklarede dette resultat ved at undersøge materialet med strengt bilateral trepanobiopsy hos alle patienter. Den primære metode til bestemmelse af immunfænotypen af ​​en leukemisk klon i denne nosologi bør betragtes som PC aspirat, hvilket tillader at bestemme CD5 antigenet på klonale B-lymfocytter og ekspressionsniveauet af CD20-molekylet. Imidlertid er der blevet akkumuleret nok tilfælde for dette lymfom med en afvigende ekspressionsprofil af immunologiske markører: uden ekspression af CD5 med positiv ekspression af CD23 [50], co-ekspression af CD5 og CD23 [51], CD5 og CD10 [42,44], CD10 i fravær af CD5 [52].Desuden det vigtigste træk ved patognomonisk lymfom, ifølge WHO klassifikation (2001), overudtrykkes cyclin D1, der er forbundet med en translokation (11; 14) påvirker gen loci, der koder den tunge kæde immunoglobulinlocus af kromosom 14 og Bcl 1 (cyclin D1) på x omosome 11 [53-57]. Det menes at denne genetiske begivenhed spiller en vigtig rolle i patogenesen af ​​udviklingen af ​​lymfom i mantelzonen, da overekspression af cyclin D1 (proteinregulator i cellecyklussen) blokerer cellen ved grænsen for G1-faseovergangen? S. Cyclin D1 refererer til proteiner udtrykt på nuklearmembranen, så den eneste måde at bestemme den i dag er immunhistokemimetoden [58] (figur 6).


Fig. 6. Kernekspression af cyclin D1 ved knoglemarvsubstrat lymfomceller fra mantleceller. Immunohistokemi, SW. 250

Det kan således siges, at den primære bestemmelse af leukemisk klonens immunfænotype med LMC er mest hensigtsmæssig ved anvendelse af PC'en, men den endelige identifikation af diagnosen kræver en immunhistokemisk undersøgelse af trepanobioptat CM.

Follikulært lymfom (FL)

Ifølge statistiske data bestemmes inddragelsen af ​​QM i PL i 40-60% af tilfældene [59, 60], og omsætningen af ​​tumorceller i perifert blod bestemmes hos mindre end en tredjedel af patienterne [8].

Karakteristisk for PL intensiteten af ​​sklerotiske forandringer i KM, og sandsynligvis også adhæsion molekyler ekspressionsprofil ganske ofte hindre indtrængning af neoplastiske celler i aspirater [61-63], således at den vigtigste metode til at undersøge CM ved kendte immunfænotype extramedullaere tumorer kan antage trepanobioptate histologi. Eksistensen af ​​en "gyldig diagnostisk standard" i PL - paratrabekulyarnogo lokalisering af lymfom substrat med centrocyt-centroblast sammensætning - gør det muligt for morfologen at begrænse niveauet af standard undersøgelsen KM uden brug af immunhistokemisk farvning.

En immunhistokemisk undersøgelse i PL er påkrævet for at bestemme den minimale resterende infiltration af CM, når man vurderer fuldstændigheden af ​​remission [64]. Men med et minimalt antal B-celler er vurderingen af ​​deres natur allerede ud over IHC's evner og kan kun udføres på basis af definitionen af ​​klonal omlejring af immunoglobulin-gener eller pathognomonisk translokation t (14; 18).

Marginal lymfom (LMZ)

I WHO-klassifikationen (2001) skelnes der mellem 3 hovedtyper af lymfomer, der stammer fra celler fra den marginale mantelzone af lymfoide follikler eller periarteriolære lymfoide koblinger. Disse er LMZ i milten, nodal version af LMZ, såvel som den variant der er forbundet med slimhinder (MALT).

I LMZ af milten er CM-beskadigelse ifølge forskellige kilder mest almindelig i 67-100% af tilfældene [65-68], med MALT-lymfomer i ca. 20% [65, 69, 70]. CM 's involvering med nodalversionen betragtes som kriminalitet, som dog kan forklares ved sjældenheden af ​​selve nosologien [12, 71, 72]. På tidspunktet for immunophenotyping etableres diagnosen af ​​LMZ mere sandsynligt ved eliminationsmetoden, da typiske immunologiske markørforeninger ikke er defineret. Ekspression af pan-B-lineære antigener er karakteristisk i fravær af co-ekspression af CD5, CD23, CD10 molekyler [1, 73-77]. For differentialdiagnose inden for LMZ-gruppen kan det være nyttigt at tage hensyn til nogle forskelle i ekspressionen af ​​overfladeimmunoglobuliner. Så for LMZ af milten er coexpression af IgM +, IgD + -molekyler karakteristiske, mens kun for IgM-molekyler i mangel af IgD er til stede for nodalvarianten [7, 78]. I dette papir vil jeg gerne fokusere på miltens LMZ-variant, som har den største tropisme for hæmatopoietisk væv. Det skal bemærkes, at en række patienter med LMZ i milten har objektive vanskeligheder ved splenektomi, derfor falder diagnosebyrden ofte på det tilgængelige leukæmiske substrat af lymfom.

Patologisk lymfocytose aspirat CM på LMZ gør det muligt at studere milt lymfomceller cytometrisk fænotype og cytogenetisk [8, 79]. Da denne lymfom har ikke tilstrækkelig typisk immunologisk og cytogenetiske karakteristika (deletion af kromosom 7 forekommer i mindre end 40% af tilfældene, trisomi af kromosom 3 - mindre end 17%) for at bekræfte diagnosen er nyttig yderligere diagnostisk information, fx identifikation af en bestemt type vækst lymfomer i trepanobioptat CM (WHO). For LMZ-milt er to patognomoniske histologiske væksttyper blevet beskrevet - intrasinusoidale og nodulære [8, 14]. I den første type af tumor definition "slam" i den vaskulære leje i undersøgelsen microcircular standard farvede snit trepanobiopatov CM ikke altid er muligt - kun ved anvendelse immunhistokemisk farvning med monoklonale antistoffer mod pan-B-cellemarkører (figur 7) [27]..


Fig. 7. Intrasinusoidal lokalisering af "sweeten" tumorceller i miltens LMZ. Immunohistokemi, farve CD20, SW. 200

Patologiske celler farvet brun kromogen (DAB), der er lineære strukturer dannet i løbet af "hamret" i Sines (mikrokar) Nodulær KM type er den anden forekomst frekvens LMZ milt. Det udmærker intertrabecular placering, vedligeholdelse resterende kim centre (variable tegn) og zoner udtrykt [8, 14, 80]. Nævnte forening morfologiske træk definerer similaritetsmål patologiske knuder med reaktive lymfoide follikler, så naturligvis ledende immunhistokemiske studier trepanobioptate CM ved nodal typen lymfom infiltration på LMZ milt også påkrævet, og i undersøgelsen, udover differentialdiagnosen med andre udførelsesformer af perifere B-celle-småcellet lymfom, omfatter udelukkelsen af ​​den reaktive karakter af lymfoid infiltration. Et yderligere træk ved neoplastisk natur lymfom infiltrerer betragtes dannelsen af ​​et netværk af follikulære dendritceller er positive for CD21, CD23 og CD35, som ikke er typisk for infiltrater i andre udførelsesformer, B-NHL og jet knuder (fig. 8) [14, 80, 81].


Fig. 8. Netværk af follikulære dendritiske celler i lymfeknuder med LISS. Immunohistokemi, farve på CD21

Leukemisering af MALT, som allerede rapporteret, er ret sjælden [65, 69, 70]. I disse lymfomer kan imidlertid tilstrækkeligt tætte T-celle-reaktive lymfoide infiltrater detekteres. Det er også muligt kun at bestemme arten af ​​disse infiltrater med undtagelse af en specifik KM læsion, der ligger til grund for korrekt opstilling med MALT, med immunophenotyping [82].

Plasma Celle B-NHL

Immunhistokemi trepanobioptate CM synes bemærkelsesværdigt forskellen diagnostisk test i en lav procentdel af plasmaceller i aspirater fra patienter med IM paraproteinemia mistænkt for indledende fase myelomatose (MM) eller overvågning minimal residual sygdom i MM i de behandlede patienter. Optimal i kombination kan betragtes informative immunosorbent og immunfluorescerende fremgangsmåder på et materiale trepanobioptate CM (fig. 9) [27, 83]. Immunohistokemi giver dig mulighed for at bestemme antallet, placeringen og cytologiske egenskaber af plasmaceller. Anvendelse af dobbelt-fluorescerende mærket antistof til immunoglobulin-lette kæder? og? giver dig mulighed for at bestemme de mono- eller polyklonale plasmaceller i et synsfelt.


Fig. 9. Reaktiv plasmacytose. og - immunhistokemisk farvning på CD138 (syndecan-1); b - immunofluorescerende farvning med et kombineret mærket antistof? (grøn glød) /? (gul glød)

I fig. 9, og det ses tydeligt, at plasmacellerne farvet med det brune kromogen har et modent udseende, de mangler atypisk atypi, og de er placeret perikapillære (langs sinus). Alle tegn er mest karakteristiske for reaktiv plasmacytose. I fig. 9b - i det mørke felt af et fluorescerende mikroskop er forholdet mellem plasmaceller, der bærer β- og β-kæder af immunoglobuliner, omtrent det samme (der er en lille overvejelse af β +), dvs. celler er ikke klonale. Diagnosen af ​​multiple myelom er udelukket.

Aggressiv B-NHL: diffus B-celle storcellelymfom (DL) og Burkitt's lymfom (LB)

Definitionen af ​​CM-beskadigelse i disse varianter med en karakteristisk morfologi synes at være temmelig simpel, og i tilfælde af den kendte immunophenotype af den ekstramedullære komponent kan den kun begrænses ved morfologisk undersøgelse af trephinbiopsi-materiale eller CM-aspirat. Af særlig interesse er undersøgelsen af ​​uoverensstemmende småcellede lymfoide infiltrater i CM med et antal B-NHL, især med DL og LB. I moderne litteratur diskuteres fænomenet uoverensstemmende histologiske situationer med DLBL, sjældent. Sammenfatning af alt tilgængeligt litterært materiale kan tre hovedårsager til uoverensstemmelse identificeres [17, 84]:

  • omdannelse til en mere aggressiv variant (stor celle NHL). Mest karakteristisk for FL og B-CLL (Richter syndrom) og er en morfologisk manifestation af en tumorprogression;
  • reaktive proces. Små celleinfiltrater i CM, i modsætning til ekstramedullær DCL, har en T-celle natur med et forskelligt forhold mellem CD4 + / CD8 + populationer;
  • sand biklonalitet. Samtidig sameksistens af to lymfoproliferative processer med forskellige immunomorfologiske og molekylære biologiske klonale egenskaber. Sådanne prime-pluraliske processer kaldes også sammensatte.

I arbejde udført i laboratoriet immunologi hæmatopoietisk RCRC af RAMS, med diskordant immunologisk undersøgelse af småcellet lymfoide infiltrater DLBCL patienter (20 patienter) tilstrækkeligt blev opnået interessante resultater. I alle tilfælde syntes lymfoide infiltrater at være repræsenteret af reaktive T-celler. Nogle bemærkninger i immunhistokemisk undersøgelse blandt T-bestemt større komponent B-celler med tegn på åbenlys atypia og lignende centroblasts immunoblast, som blev betragtet som de første tegn på knoglemarv invasion DLBCL. I disse tilfælde den immunologiske billede KM svarede udførelsesform DLBCL rig på T-celler (Fig. 10), mens de extramedullaere tumorer i alle patienter havde DLBCL klassiske form.


Fig. 10. IHH af uoverensstemmende småcellet lymfoid infiltration i CM af en patient med extranodal DLBC. a - farvning for CD3 (T-celle komponent); b - farvning på CD20 (store diskrete anaplastiske B-celler)

I en omfattende analyse af det kliniske forløb af den undersøgte gruppe, blev det bestemt, at tendensen til dannelsen af ​​T-celle klynger opfyldt, hovedsageligt hos patienter med primær lokaliseret ekstranodal DLBCL. Patienter med primære nodale former blev påvist i CM typisk blast diffus infiltration tilsvarende ekstramedullær komponent DLBCL, og T-celle-reaktive komponent blev indgivet få spredte celler (fig. 11).


Fig. 11. Immunohistokemisk undersøgelse af leukemisk substrat KM i den primære nodale DCL. og - farvning på D20: diffus vækst af en tumor med storcelle struktur; b - farvning for CD3: spredte få T-celler. SW. 200

Uforskammet infiltration af småcellelymfomer blev opdaget af os og i LB - med immunhistokemisk farvning af trepanobioptat KM syntes den også at være repræsenteret af den T-reaktive komponent (figur 12). Patientens LB har fundet sted på baggrund af HIV-infektion, og T-celleinfiltrering er sandsynligvis den syncytiale strukturskarakteristik af sygdommen.


Fig. 12. Discordant småcellet lymfoid infiltration af CM i LB. IHH, farvning på CD3

På eksemplet med uoverensstemmende situationer, har det vist sig, at immunofenotipirovanie trepanobioptate KM bortset fra rent praktisk værdi kan være en forskningsmæssig interesse. For eksempel bestemmelse af T-celle reaktive natur af småcellet lymfoide infiltrater hos patienter med primær lokaliseret ekstranodal DLBCL kan indikere høj immunogenicitet af denne formular lymfom sammenlignet med primær nodal. Yderligere undersøgelse af subpopulationer af T-reaktiv komponent, samt sammenligning af de to former af DLBCL immunfænotype med varierende immunogenicitet kan belyse de mekanismer, antitumorimmunitet i hæmatologiske maligniteter og lymfomer i almindelighed.

IHH, som enhver anden metode, har selvfølgelig sine begrænsninger. For eksempel blandet celle (T-og B-celle) lymfoide knuder i perifert B-NHL tidligere utvetydigt opfattes som reaktiv, men med udviklingen af ​​molekylærbiologiske metoder er blevet muligt at evaluere særskilt taget en B-celle komponent. På grund af dette, en masse af publikationer om retrospektiv analyse af arkivmateriale biopsi, hvori forfatterne fremførte klonale natur af B-celler isoleret fra "reaktive" infiltrerer under anvendelse af polymerasekædereaktionen (PCR) [85, 86]. Faktisk sammenlignet med immunfænotypebestemmelse molekylær diagnostik, især PCR er mere nøjagtige, gør det muligt at estimere det minimale antal lymfoide celler, der bestemmer egenskaberne af dens anvendelse - til diagnosticering af minimal infiltration med CM mellemstation tidligt i sygdomsforløbet og for at overvåge remission.

Således kan vi sige, at undersøgelsen materiale trepanobiopata CM med brugen af ​​moderne metoder for størstedelen af ​​NHL kræves test for at opnå vigtige yderligere diagnostiske oplysninger, der kritisk kan påvirke planlægningen medicinske taktik. Den mest markante bør overvejes omfattende immunomorphological undersøgelse aspirat og trepanobioptate KM (metoden til HRC aspirat KM) oprettelse immunfænotype extramedullaere tumorer komponent (når de forekommer) [27, 83, 87-90]. I laboratoriet for immunologi og hematopoiese afdeling af patologisk anatomi GU RCRC tumorer NN RAMS udviklet en integreret tilgang til diagnosticering, herunder en detaljeret histologisk undersøgelse af den primære substrat NHL paraffinblok med en detaljeret immunhistokemi i det friske materiale (kryostatsnit), og cytokemiske vurdering Immunomorfologichesky aspirater CM suppleret IHC trepanobioptate [91].

Materiale taget fra tidsskriftet "Oncohematology", №1-2, 2006.